1.簡介
微生物形體微小，極易通過各種途徑入侵、擴散，目前的檢疫、檢測措施又難以及時發現和阻隔，而微生物入侵對人類健康、經濟發展，乃至社會穩定和安全均構成嚴重威脅 。因此有必要對注射劑的容器密封系統完好性進行挑戰性實驗，確定工藝流程的穩固程度，防止微生物入侵以確保產品質量。
微生物侵入試驗是對終滅菌容器／密封件系統完好性的挑戰性試驗。在驗證試驗中，取輸液瓶或西林瓶(小瓶)，灌裝入培養基，在正常生產線上壓塞、壓蓋滅菌。此后，將容器密封面浸入高濃度運動性菌液中，取出、培養并檢查是否有微生物侵入，確認容器密封系統的完好性。此同時，需作陽性對照試驗，確認培養基的促菌生長能力。
2.系統描述
本次密封系統的完好性試驗采用灌裝大豆胰蛋白胨肉湯培養基，經壓塞、軋蓋、滅菌、微生物侵入試驗，試驗分為兩組，A組為正常微生物侵入試驗，B組為微生物挑戰試驗，檢查產品密封可靠性是否達到要求，并對試驗結果進行分析研究。
3.驗證目的
通過密封系統的完好性試驗確認10ml瓶塞蓋組成的密封系統完好性良好，能夠產品能防止外界污染的工藝要求。
4.1試樣制備
4.1 .1培養基的配制：用大豆胰蛋白胨肉湯培養基，按30g加1L注射用水的比例配制1.6L，膠塞、鋁蓋 、西林瓶121℃ 40min滅菌
4.1.2試樣密封：在生產線上灌裝大豆胰蛋白胨肉湯培養基（或取潔凈西林瓶用潔凈注射器灌裝），裝量為8ml/瓶，灌裝130瓶，使用自動壓塞和軋蓋設備將西林瓶密封。
4.1.3試樣滅菌：將密封后試樣于121℃，15min濕熱滅菌。[備注：采用加熱方式進行終滅菌，終滅菌產品中的微生物存活概率（即無菌水平， SAL）不得高于10-6。 采用濕熱滅菌方法進終滅菌的，通常標準滅菌時間F0值應當大于8分鐘]
4.1.4試樣預培養：從蒸汽滅菌器中取出試樣，冷卻，將每一試樣倒轉，使培養基與西林瓶內表面充分接觸，在30～35℃下豎放培養14天。
4.1.5 B組試樣培養：小心擰松至少50個試樣的鋁蓋，注意不要破壞其密封口，將擰松鋁蓋時不慎損壞西林瓶密封性的所有試樣剔除；同時挑選至少10個封口處缺損的西林瓶；兩者標記后在30～35℃下倒轉豎放培養14天。
5.試驗設備：LT-PNP微生物入侵試驗儀
測試原理
可進行正負壓交替試驗，檢測試樣在不同壓力差下的泄漏狀況。從而判斷試樣的物理性能和泄漏位置。
LT-PNP微生物入侵試驗儀
產品特征
1. 7寸彩色觸摸屏，實時查看試驗數據和試驗曲線
2. 正壓和負壓一體式設計原理，可實現色水法和微生物侵入密封性等試驗項目自由選擇
3. 配備高速采樣芯片，測試數據的實時性和準確度
4. 采用日本SMC氣動元件，可靠
5. 大量程測試范圍，滿足用戶更多試驗要求
6. 自動恒壓，整個實驗過程穩定、準確
7. 自動反吹卸載，減少人為干預
8. 正壓、負壓、保壓時間，以及試驗順序和循環次數皆可預置，一鍵完成試驗
9. 試驗腔設計，既可樣品浸入溶液，又試驗過程中實驗人員不接觸溶液
10. 氣路一體集成式設計，壓力保持效果好，并且有效延長設備使用壽命
11.用戶分級權限設置，滿足 GMP 要求、測試記錄審計、追蹤功能（可選）
12.試驗曲線實時顯示，便于快速查看測試結果，支持歷史數據快速查看
13. 設備配備標準通訊接口，可連接計算機，通過軟件可實時顯示試驗數據和試驗曲線
