微生物挑戰法，又稱微生物入侵法，屬于較為常見的一種密封完整性測試方法，通常與模擬灌裝同時進行。試驗通過模擬灌裝驗證方案進行培育基模擬灌裝，然后進行壓塞軋蓋后，目檢是否合格，已經驗證的滅菌柜滅菌后，把容器密封面浸入到菌液中，使樣品容器內的培育基完quan接觸封口內表面，樣品的封口和頸部的外表面應浸泡在菌懸液中，浸泡肯定時間后取出，定期培育后檢查是否有微生物侵入，以確定容器密封系統的完整性。同時，需要做陽性對比試驗，確認培育基的促生長力量。
檢測設備：
LT-PNP微生物入侵試驗儀
試驗方法：
1、把50個經滅菌的試樣，分開編號，充分侵入菌懸液中，同時將試樣平放，使袋內的無菌培育基充分接觸焊接部位的內表面，試樣容器在菌懸液中持續浸泡4小時。
2、浸泡結束時再取一份菌懸液，用平板計數菌懸液的濃度。
3、從菌懸液中取出試樣，擦干試樣容器外殘余的菌懸液，然后用含0.5%過乙酸的70%異丙醇消毒容器外表面。
4、取裝滿培育基樣品兩個，作陽性對比，其外表用含0.5%過乙酸的70%異丙醇消毒，接種入10~～100CFU銅綠假單胞菌。
推斷標準：
1、步驟2、步驟4、5中進行的養分性試驗都合格，試樣的挑戰試驗方可有效。
2、在挑戰試驗開頭時，挑戰用菌懸液濃度（活菌數）必需達到1×106CFU/ml。
3、挑戰試驗中如長菌，需記錄長菌的試樣數，并按下述要求作進一步調查。
4、仔細檢查容器各部位封口處是否有缺損，以免造成微生物浸入。
5、把看到的試樣容器封口的缺陷，拍照并且具體記錄。
